熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)即熱帶念珠菌,是常見(jiàn)的假絲酵母。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)有270余種念珠菌,其中引起人類致病的念珠菌主要有白色念珠菌(C.albicans)、熱帶念珠菌(C.tropical)、假熱帶念珠菌(C.pseudotropicalis)、近平滑念珠菌(C.parapsilosis)、克柔念珠菌(C.kruseii)、星形念珠菌(C.stellatoidea)、光滑念珠菌(C.glabrata)、高里念珠菌(C.guilliermondii),均為條件致病菌,其中以白色念珠菌毒力最強(qiáng),也最常見(jiàn)。念珠菌在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較快,為橢圓形芽生細(xì)胞,在特殊培養(yǎng)基上形成菌絲。菌種的鑒別需依靠生化試驗(yàn)。
一、菌種簡(jiǎn)介
菌株名稱:熱帶假絲酵母
別 稱:熱帶念珠菌
界:真菌界
門:子囊菌門
亞 門:酵母亞門
綱:酵母綱
其它編號(hào):AS2.637
培養(yǎng)基編號(hào):13
培養(yǎng)溫度:25-28
培養(yǎng)時(shí)間:48h
用途:飼料酵母
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用。
二、生存環(huán)境
熱帶念珠菌是一種腐物寄生菌,廣泛存在于自然界,可從水果、蔬菜、乳制品、土壤中分離出。也可存在于健康人體的皮膚、陰道、口腔和消化道等部位。約10%的健康婦女和30%的孕婦可無(wú)任何臨床癥狀而陰道內(nèi)帶有念珠菌。當(dāng)機(jī)體抵抗力降低或陰道局部環(huán)境發(fā)生改變時(shí),熱帶念珠菌就大量繁殖,產(chǎn)生病變。所以,熱帶念珠菌是一種條件致病菌。 10%~20%非孕婦女及30%孕婦陰道中有此菌寄生但菌量極少鵻,呈酵母相,并不引起癥狀。熱帶念珠菌生長(zhǎng)最適宜的pH值為5.5,陰道的弱酸性環(huán)境能保持陰道的自潔功能,正常人為3.7-4.5,但陰道的弱酸性改變?yōu)閜H5.5后,熱帶念珠菌大量繁殖,并轉(zhuǎn)變?yōu)榫z相鵻,才引發(fā)陰道炎癥狀。
三、系統(tǒng)位置
真菌界 半知菌亞門 芽孢菌綱 隱球酵母目 隱球酵母科 念珠菌屬 熱帶念珠菌
四、菌株形態(tài)
是一種雙相型單細(xì)胞酵母菌,熱帶念珠菌(C.tropicalis)是生殖器念珠菌病的第二病原菌。為芽生,有假菌絲,有厚壁孢子、無(wú)子囊。一般情況下呈卵圓形 的單壁細(xì)胞。大小為2μm X 6μm,成群分布,尚可見(jiàn)分隔的假菌絲,革蘭染色陽(yáng)性。熱帶念珠菌在人體中可見(jiàn)到不同期表現(xiàn),無(wú)癥狀時(shí)為酵母型,呈圓形或橢圓形;在侵犯黏膜組織致病時(shí),常表現(xiàn)為菌絲型,為長(zhǎng)條型的假菌絲。
五、檢查方法
念珠菌顯色培養(yǎng)基根據(jù)酶底物法,通過(guò)顯色來(lái)區(qū)別不同念珠菌,25-28培養(yǎng)48小時(shí)后,白色念球菌藍(lán)綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色,光滑念珠菌顯紫色,克柔假絲酵母顯粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
用法:稱取本品9.6g(可按4.8g/100ml的比例擴(kuò)大或縮?。?,加入200ml蒸餾水或純化水中,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過(guò)1分鐘。將加熱后的培養(yǎng)基水浴冷卻至45-50,輕輕地?fù)u勻,傾入無(wú)菌平皿(9cm的15ml/皿,7cm的10ml/皿),瓊脂完全凝固后,在36±1的培養(yǎng)箱中倒置放置0.5-1小時(shí),備用。
操作步驟:
1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液涂布或劃線接種于平板上;
3、25-28培養(yǎng)48h。白色念珠菌典型特征為藍(lán)綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色,光滑念珠菌顯紫色,克柔假絲酵母顯粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
4、對(duì)可疑白色念珠菌菌落可劃線接種到PDA瓊脂平板上,25-28培養(yǎng)24-48小時(shí),挑取單菌落做鏡檢和生化試驗(yàn)。
六、培養(yǎng)方法
在葡萄糖—酵母汁—蛋白胨液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),25,3天,細(xì)胞呈球形或卵球,其中大小為4~8×6~11µm。在麥芽汁瓊脂上菌落為白色到奶油色,無(wú)光澤或稍有光澤。軟而平滑或部分有皺紋。培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)時(shí),菌落變硬。在加蓋玻片的玉米粉瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng),可看到大量的假菌絲和芽生孢子。
熱帶假絲酵母氧化烴類的能力強(qiáng),在230~290石油餾分的培養(yǎng)基中,經(jīng)22h后,可得到相當(dāng)于烴類重量92%的菌體。所以,是生產(chǎn)石油蛋白質(zhì)的重要菌種。用農(nóng)副產(chǎn)品和工業(yè)廢棄物也可培養(yǎng)熱帶假絲酵母。如用生產(chǎn)味精的廢液培養(yǎng)熱帶假絲酵母作飼料,既擴(kuò)大了飼料來(lái)源,又減少了工業(yè)廢水對(duì)環(huán)境的污染。
七、快速鑒定
以傳統(tǒng)發(fā)酵法檢測(cè)光滑念珠菌、白念珠菌、熱帶念珠菌發(fā)酵海藻糖情況。采用4%海藻糖液孵育各試驗(yàn)株3小時(shí)后用尿糖試紙檢測(cè)。E-test法測(cè)試光滑念珠菌對(duì)氟康唑、伊曲康唑的敏感性。結(jié)果:光滑念珠菌與熱帶念珠菌皆可發(fā)酵海藻糖,尿糖試紙呈陽(yáng)性反應(yīng),但后者菌落在科瑪嘉色原培基為藍(lán)色,在米粉吐溫瓊脂有假菌絲。結(jié)論:采用海藻糖法配合米粉吐溫瓊脂或科瑪嘉色原培養(yǎng)基可以快速簡(jiǎn)便鑒定光滑念珠菌和熱帶念珠菌。