----染色鏡檢
將上述可疑純培養(yǎng)物做革蘭氏染色并做濕片檢查; 利斯特菌為革蘭氏陽(yáng)性短桿菌, 大小為0.4~0.5μm×0.5~2.0μm;用生理鹽水制成菌懸液, 在油鏡或相差顯微鏡下觀察, 該菌出現(xiàn)輕微旋轉(zhuǎn)或翻滾樣的運(yùn)動(dòng)。
該菌為革蘭氏陽(yáng)性無芽孢桿菌,在純培養(yǎng)物中呈短小桿菌,在初齡培養(yǎng)物中呈球桿菌狀,在老齡培養(yǎng)物中呈長(zhǎng)絲的長(zhǎng)桿菌狀,有些細(xì)菌因此而變成革蘭氏陰性;為需氧或兼性厭氧菌,在20~25培養(yǎng)時(shí)能形成4根鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑;在37培養(yǎng)時(shí)無鞭毛,運(yùn)動(dòng)消失。
----初篩
在我們前期工作中發(fā)現(xiàn),高污染樣品在選擇性瓊脂平板上可疑菌落較多,為避免漏檢和減少工作量,增加初篩步驟:挑取典型或可疑菌落接種在木糖、鼠李糖發(fā)酵管中,無須燒環(huán)同時(shí)TSA-YE平板上劃線分離純菌。
----初篩及純培養(yǎng)
自選擇性瓊脂平板上分別挑取5個(gè)以上典型或可疑菌落,分別接種在木糖、鼠李糖發(fā)酵管,于37培養(yǎng)24h;同時(shí)在胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA-YE)平板上劃線純化,于30培養(yǎng)24h-48h。木糖陰性為藍(lán)色,鼠李糖陽(yáng)性為黃色,在TSA-YE平板上可疑菌落為淡藍(lán)色。