一、產(chǎn)品簡介
1. 產(chǎn)品名稱：人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞
2. 組織來源：關(guān)節(jié)
3. 產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4. 細(xì)胞簡介：
滑膜是關(guān)節(jié)囊的內(nèi)層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤，由疏松結(jié)締組織組成。關(guān)節(jié)腔內(nèi)的所有結(jié)構(gòu)，除關(guān)節(jié)軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關(guān)節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹?；し置诨?，在關(guān)節(jié)活動中起重要作用。正?；し譃閮蓪?，即薄的細(xì)胞層(內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層)，是血管豐富的關(guān)節(jié)囊內(nèi)膜，貼附于非關(guān)節(jié)面部分，覆蓋于關(guān)節(jié)囊內(nèi)的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱為邊緣區(qū)或“裸區(qū)”。滑膜呈粉紅色，光滑發(fā)亮、濕而潤滑，有時(shí)可見絨毛，內(nèi)含膠原性纖維。
滑膜細(xì)胞有A、B兩型。巨噬細(xì)胞樣A型細(xì)胞，表面有絲狀偽足、漿膜內(nèi)陷、囊泡、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體，具有吞噬功能；B型成纖維樣滑膜細(xì)胞(FLS) ，有高濃度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)，是介導(dǎo) RA 關(guān)節(jié)破壞的主要細(xì)胞。
本公司生產(chǎn)的人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性，純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系作為體外培養(yǎng)人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)基。
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞可傳5~8代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時(shí)間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細(xì)胞只可用于科研。
備注：由于實(shí)驗(yàn)所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實(shí)驗(yàn)室參考
