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人淋巴瘤細胞(T2)

人淋巴瘤細胞特性

1) 來源:淋巴瘤

2) 形態(tài):圓形,懸浮生長

3) 含量:>1x106 

4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝 

 
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,收到后 立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80 度冰箱凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生 長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。 收到細胞后請拍照,3 天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系。 
 
細胞接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細 胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。 
2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)時,最好在低倍鏡(4 或 5X 物鏡)下進行,能 準確判斷細胞的傳代密度??醇毎男螒B(tài)請在 10X 和 20×物鏡下,同時給剛收 到的細胞拍照,(10×,20×)各 2-3 張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為細 胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。
4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落 或者脫落后抱團生長,可將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h,然后抽出瓶中 的培養(yǎng)基和未貼壁細胞 1000rpm 離心 5 分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照 說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中(或新的培養(yǎng)瓶中)。
5) 懸浮細胞:T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和 細胞 1000rpm 離心 5 分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說 明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。 
6)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說 明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建 議 1:2 傳代 。 
細胞用途:僅供科研使用。 
                        
本公司的細胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備 IMEM 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,20%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度 為 70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管迅速放入 37℃水浴中(水面要低 于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有 4mL培養(yǎng)基的 15ml 離心管中混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,加入 1mL培 養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有 5ml 培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。 第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。 注:第一次傳代推薦傳代比例為 1:2,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。 1,細胞凍存時,取上清,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。2,4min ,1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量 加入血清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度 1-2xE6/ml,每支 凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍存管做好標識。 3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,至少 2 個小時以后轉(zhuǎn)入液 氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 
 
注意事項:  1. 收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染, 請立即與我們聯(lián)系。 2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作, 并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。