| 菌株簡(jiǎn)介 |
SURE菌株是設(shè)計(jì)用來(lái)克隆在傳統(tǒng)菌株無(wú)法克隆的DNA片段。真核生物DNA存在較多“十字型” 、“Z字型” 等二級(jí)或三級(jí)結(jié)構(gòu)，這種DNA結(jié)構(gòu)在利用傳統(tǒng)大腸桿菌進(jìn)行克隆時(shí)易被大腸桿菌體內(nèi)的重組酶系統(tǒng)或其他防御系統(tǒng)識(shí)別并對(duì)其進(jìn)行重組，刪除等破壞，導(dǎo)致很難對(duì)這類DNA進(jìn)行正確的克隆操作。SURE菌株可以解決這些問題：此菌株體內(nèi)重組酶系統(tǒng)整條通路被破壞，并且(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-) 這些限制性突變的存在賦予此菌株無(wú)法對(duì)外源DNA進(jìn)行標(biāo)記、限制的能力，提高了外源甲基化DNA的克隆效率，同時(shí)具有核酸酶 (endA)突變、重組酶 (recB recJ)突變，增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性。存在于F′因子上的lacIqZΔM15基因使此菌株可以進(jìn)行藍(lán)白斑篩選；Kanr，Tetr賦予菌株卡那霉素和四環(huán)素抗性。 |
