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Hce-8693
Hce-8693
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-0504
品牌:Mingzhoubio

活化細(xì)胞
凍存細(xì)胞
熒光標(biāo)記細(xì)胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產(chǎn)品名稱 Hce-8693
商品貨號 MZ-0504
中文名稱 人盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)
組織來源 盲腸未分化腺癌;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移
形態(tài)特征 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 Hce-8693源自一位男性盲腸未分化腺癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病理切片。它的倍增時間是30.4小時,有絲分裂指數(shù)是28.8%。電子顯微鏡檢查呈現(xiàn)巨核,核仁分界明顯,微絲豐富,并有分泌顆粒。染色體模式數(shù)是48。在軟瓊脂上成克隆的比率是8%。細(xì)胞中和培養(yǎng)液上清中CEA陽性。當(dāng)異體移植到裸鼠時,Hce8693細(xì)胞長成的瘤與患者原病灶一樣,在細(xì)胞質(zhì)中有阿爾新藍(lán)陽性物質(zhì)。
細(xì)胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細(xì)胞凍存步驟 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。明舟生物按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復(fù)蘇細(xì)胞步驟 將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代步驟 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS 
姓名 手機(jī)號(微信同號) QQ
梅經(jīng)理 17280875617 1438578920
胡經(jīng)理 13345964880 2438244627
周經(jīng)理 17757487661 1296385441
于經(jīng)理 18067160830 2088210172
沈經(jīng)理 19548299266 2662369050
李經(jīng)理 13626845108 972239479