產(chǎn)品名稱 |
人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞 |
商品貨號(hào) |
MZ-3540 |
組織來(lái)源 |
正常人甲狀腺組織 |
規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)基 |
M199培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等,建議購(gòu)買原代細(xì)胞配套完培 |
細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
細(xì)胞描述 |
甲狀腺球蛋白(Tg)免疫熒光染色為陽(yáng)性 |
細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
主要功能 |
(1) 甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞合成和分泌甲狀腺激素。 (2) 濾泡上皮細(xì)胞從血中攝取氨基酸,在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成甲狀腺球蛋白的前體,繼而在高 爾基復(fù)合體加糖并濃縮形成分泌顆粒,再以胞吐方式排放到濾泡腔內(nèi)貯存。 (3) 濾泡上皮細(xì)胞能從血中攝取I-,它在過(guò)氧化物酶的作用下活化,再進(jìn)入泡腔與甲狀腺 球蛋白結(jié)合成碘化的甲狀腺球蛋白。 (4) 濾泡上皮細(xì)胞在腺垂體分泌的促甲狀腺激素的作用下,以胞吞方式將濾泡腔內(nèi)的碘化 甲狀腺球蛋白再吸收入胞質(zhì),成為膠質(zhì)小泡。膠質(zhì)小泡與溶酶體融合,小泡內(nèi)的甲狀腺球蛋 白被水解酶分解形成大量四碘甲腺原氨酸(T4,即甲狀腺素thyroxine)和少量三碘甲腺原氨酸 (T3)。 (5) 濾泡上皮細(xì)胞附近可見(jiàn)腎上腺素能神經(jīng)末梢,故細(xì)胞的分泌活動(dòng)受神經(jīng)調(diào)節(jié)。 |
主要病生理變化 |
(1) 甲狀腺炎。 (2) 甲狀腺腫瘤。 (3) 甲狀腺癌。 (4) 甲狀腺功能低下或亢進(jìn)。 |