產(chǎn)品名稱 |
大鼠皮膚成纖維細胞 |
商品貨號 |
MZ-3915 |
組織來源 |
皮膚成纖維細胞 |
規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 |
貼壁 |
細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
細胞描述 |
成纖維細胞是來源于胚胎中胚層間充質(zhì)細胞。已經(jīng)廣泛用于廣泛的細胞和分子研究。有充分的證據(jù)表明,成纖維細胞在身體的不同部位是本質(zhì)上不同的[1]。組織內(nèi)成纖維細胞暴露于一個動態(tài)的機械環(huán)境,即會影響健康和治療軟組織的結(jié)構(gòu)完整性。成纖維細胞分泌一種非剛性的細胞外基質(zhì),有豐富的I型和/或III型膠原蛋白[2]。此外,真皮成纖維細胞還分泌大量的透明質(zhì)酸在反應(yīng)炎癥刺激[3]。 |
細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 |
細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |