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小鼠氣管平滑肌細胞
小鼠氣管平滑肌細胞
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-420
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產(chǎn)品名稱 小鼠氣管平滑肌細胞
商品貨號 MZ-420
組織來源 昆明、C57小鼠(3-4周齡)8-10只
規(guī)格 5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
培養(yǎng)基 DMEM高糖培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 哮喘是一種常見的氣道慢性炎癥性疾病,目前我國有約 2000 萬人罹患哮喘。近些年,由于霧霾等空氣質(zhì)量與環(huán)境污染程度的日益惡劣,呼吸系統(tǒng)疾病也逐漸成為了全世界范圍影響人類健康最嚴重的慢性疾病之一,據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測,到2025年,世界上將會有 4 億人患上哮喘。哮喘發(fā) 病 癥 狀 眾 多,早 期 表 現(xiàn) 為 過 敏 性 炎癥,后期由于氣管平滑肌增生,阻塞氣管,導(dǎo)致氣道狹窄、氣道高反應(yīng)及氣道重塑,患者出現(xiàn)胸悶、氣喘等癥狀,嚴重時危及生命。因此,對哮喘的發(fā)病機理與治療的研究是至關(guān)重要的。在對哮喘發(fā)病機制的研究中,氣管平滑肌是針對氣道阻塞性癥狀的主要研究目標之一,針對氣 管 平 滑 肌 細 胞 ( airway smooth muscle cells,ASMCs) 的形態(tài)學(xué)觀察與細胞增殖速率的測量是在細胞生物學(xué)水平研究哮喘發(fā)病機制的常用手段。
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復(fù)蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
姓名 手機號(微信同號) QQ
梅經(jīng)理 17280875617 1438578920
胡經(jīng)理 13345964880 2438244627
周經(jīng)理 17757487661 1296385441
于經(jīng)理 18067160830 2088210172
沈經(jīng)理 19548299266 2662369050
李經(jīng)理 13626845108 972239479