產(chǎn)品名稱(chēng) |
人胃癌組織源性原代細(xì)胞 |
商品貨號(hào) |
MZ-4266 |
組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的胃癌組織。 |
規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
細(xì)胞描述 |
胃癌可發(fā)生于胃的任何部位,半數(shù)以上發(fā)生于胃竇部、胃小彎及前后壁,其次在賁門(mén)部,胃 體區(qū)相對(duì)較少。 早期胃癌的病理組織學(xué)類(lèi)型與進(jìn)行期胃癌大致相似。可見(jiàn)高分化型腺癌、低分化型腺癌及未 分化型癌。從形態(tài)上有乳頭狀腺癌、管狀腺癌、印戒細(xì)胞癌及粘液腺癌。 全國(guó)胃癌協(xié)作組參考世界衛(wèi)生組織(WHO)與日本胃癌研究會(huì)的分類(lèi)方法結(jié)合我國(guó)的情況, 把早期胃癌的組織學(xué)類(lèi)型規(guī)定為:乳頭狀腺部、管狀腺癌(高分化及中等分化)、低分化腺 癌、印戒細(xì)胞癌、粘膜腺癌、硬癌、未分癌及混合型癌。 |
細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
組織學(xué)分型 |
1.早期胃癌:不論范圍大小,早期病變僅限于粘膜及粘膜下層??煞致∑鹦停ㄏ⑷庑停\ 表型(胃炎型)和凹陷型(潰瘍型)三型。Ⅱ型胃癌中又分Ⅱa (隆起表淺型),Ⅱb (平 坦表淺型)及Ⅱc (凹陷表淺型)三個(gè)亞型。以上各型胃癌可有不同的組合。如Ⅱc+Ⅱa , Ⅱc+ Ⅲ等。早期胃癌中直徑在5-10mm 者稱(chēng)小胃癌,直徑<5mm 的胃癌稱(chēng)微小胃癌。 2.中晚期胃癌:也稱(chēng)進(jìn)展型胃癌,癌性病變侵及肌層或全層,常有轉(zhuǎn)移,有以下幾種類(lèi)型: (1)蕈傘型(或息肉樣型):約占晚期胃癌的1/4,癌腫局限,主要向腔內(nèi)生長(zhǎng),呈結(jié)節(jié)狀、 息肉狀,表面粗糙如菜花,中央有糜爛、潰瘍,亦稱(chēng)結(jié)節(jié)蕈傘型。胃癌癌腫呈盤(pán)狀,邊緣高 起,中央有潰瘍者胃癌稱(chēng)盤(pán)狀蕈傘型。 (2)潰瘍型:約占晚期胃癌的1/4 。又分為局限潰瘍型和浸潤(rùn)潰瘍型,前者的特征為胃癌 癌腫局限,呈盤(pán)狀,中央壞死。常有較大而深的潰瘍;潰瘍底一般不平,邊緣隆起呈堤狀或 火山口狀,胃癌癌腫向深層浸潤(rùn),常伴出血、穿孔。浸潤(rùn)潰瘍型的特征為胃癌癌腫呈浸潤(rùn)性 生長(zhǎng),常形成明顯向周?chē)吧畈拷?rùn)的腫塊,中央壞死形成潰瘍,常較早侵及漿膜或發(fā)生淋 巴結(jié)轉(zhuǎn)移。(3)浸潤(rùn)型:此型也分為兩種,一種為局限浸潤(rùn)型,胃癌組織浸潤(rùn)胃壁各層,多限于胃竇 部,浸潤(rùn)的胃壁增厚變硬,皺壁消失,多無(wú)明顯潰瘍和結(jié)節(jié)。浸潤(rùn)局限于胃的一部分者,稱(chēng) “局限浸潤(rùn)型”。另一種是彌漫浸潤(rùn)型,又稱(chēng)皮革胃,胃癌組織在粘膜下擴(kuò)展,侵及各層, 范圍廣,使胃腔變小,胃壁厚而僵硬,粘膜仍可存在,可有充血水腫而無(wú)潰瘍。 (4)混合型:同時(shí)并存上述類(lèi)型的兩種或兩種以上胃癌病變者。 (5)多發(fā)癌:胃癌組織呈多灶性,互不相連。如在萎縮性胃炎基礎(chǔ)上發(fā)生的胃癌即可能屬 于此型,且多在胃體上部。 |