| 產(chǎn)品名稱(chēng) |
人結(jié)腸癌組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4268 |
| 組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的結(jié)腸癌組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理形態(tài)分析 |
1.腫塊型(菜花型、軟癌)結(jié)腸癌：腫瘤向腸腔內(nèi)生長(zhǎng)、瘤體較大，呈半球狀或球狀隆起，易 潰爛出血并繼發(fā)感染、壞死。該型多數(shù)分化較高，侵潤(rùn)性小，生長(zhǎng)較慢，好發(fā)于右半結(jié)腸。 2.侵潤(rùn)型(縮窄型、硬癌)結(jié)腸癌：腫瘤環(huán)繞腸壁侵潤(rùn)，有顯著的纖維組織反應(yīng)，沿粘膜下生 長(zhǎng)，質(zhì)地較硬，易引起腸腔狹窄和梗阻。該型細(xì)胞分化程度較低，惡性程度高，出現(xiàn)轉(zhuǎn)移早。 好發(fā)右半結(jié)腸以遠(yuǎn)的大腸。 3.潰瘍型結(jié)腸癌：腫瘤向腸壁深層生長(zhǎng)并向腸壁外侵潤(rùn)，早期即可出現(xiàn)潰瘍，邊緣隆起，底 部深陷，易發(fā)生出血、感染，并易穿透腸壁。細(xì)胞分化程度低，轉(zhuǎn)移早。是結(jié)腸癌中最常見(jiàn) 的類(lèi)型，好發(fā)于左半結(jié)腸、直腸。 |
| 組織學(xué)分型 |
1.腺癌：大多數(shù)結(jié)腸癌是腺癌，約占四分之三，腺癌細(xì)胞可辨認(rèn)，排列成腺管狀或腺泡狀， 按其分化程度可分為三級(jí)，Ⅲ級(jí)分化最差，細(xì)胞排列為片狀或索條狀。 2.粘液癌：癌細(xì)胞分泌粘液，在細(xì)胞內(nèi)可將細(xì)胞核擠到一邊(狀似戒指，有稱(chēng)作印戒細(xì)胞癌)， 在細(xì)胞外可見(jiàn)間質(zhì)內(nèi)有粘液以及纖維組織反應(yīng)，癌細(xì)胞在片狀粘液中似小島狀。分化低，予 后較腺癌差。 3.未分化癌：癌細(xì)胞小，形狀與排列不規(guī)則，易侵入小血管及淋巴管，侵潤(rùn)明顯。分化很低， 愈后最差。 |
| 臨床分期 |
目前較為統(tǒng)一的結(jié)腸癌分期是Dukes 分期 Ⅰ期(Dukes A 期)：結(jié)腸癌局限于腸壁內(nèi) A0 期：結(jié)腸癌局限于粘膜 A1 期：結(jié)腸癌局限于粘膜下層 A2 期：結(jié)腸癌侵及腸壁肌層未穿透漿膜 Ⅱ期(Dukes B 期)：結(jié)腸癌侵潤(rùn)至腸壁外 Ⅲ期(Dukes C 期)：伴有淋巴腺轉(zhuǎn)移 C1 期：近處淋巴轉(zhuǎn)移(腸旁) C2 期：遠(yuǎn)處淋巴轉(zhuǎn)移(系膜) Ⅳ期(Dukes D 期)：結(jié)腸癌已有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 www |
