| 產(chǎn)品名稱(chēng) |
人直腸癌組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4269 |
| 組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的直腸癌組織 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理形態(tài)分析 |
1、直腸癌腫塊型：又稱(chēng)菜花型癌。癌腫向腸腔內(nèi)突出，浸潤(rùn)腸壁少，癌腫增大時(shí)表面可產(chǎn) 生潰瘍，預(yù)后較差。 2、直腸癌潰瘍型：多見(jiàn)，占50%，向腸壁深層生長(zhǎng)，并向四周浸潤(rùn)，易出血，分化程度低， 較早轉(zhuǎn)移。 3、直腸癌狹窄型：少見(jiàn)，又稱(chēng)浸潤(rùn)性。癌腫沿腸壁蔓延浸潤(rùn)，易引起腸壁狹窄，轉(zhuǎn)移早且 預(yù)后差。 |
| 組織學(xué)分型 |
1、管狀腺癌：癌組織細(xì)胞呈管狀樣結(jié)構(gòu)。 根據(jù)分化程度，可分化為三級(jí)： （1）高分化腺 （2）中分化腺癌 （3）低分化腺癌 2、粘液腺癌：癌細(xì)胞中出現(xiàn)大量粘液。粘液成分占全部癌組織細(xì)胞60％以上，才能診斷為 粘液腺癌。60%一下則不屬于粘液腺癌，以粘液的多少來(lái)作為診斷標(biāo)準(zhǔn)，粘液腺癌大約占直 腸腺癌的20%左右。 3、乳狀腺癌：癌組織細(xì)胞呈粗細(xì)大小不等的乳頭狀結(jié)構(gòu)，乳頭中央為中心索。 乳狀腺癌根據(jù)生長(zhǎng)方式可分兩種： （1）腺癌組織細(xì)胞向粘膜表面生長(zhǎng)呈絨毛狀腺瘤。 （2）腫瘤向深部腺腔內(nèi)蔓延侵潤(rùn)呈囊狀結(jié)構(gòu)呈乳頭狀增生。 4、未分化癌：癌細(xì)胞比較小，呈團(tuán)塊狀，形狀與排列不整齊，容易侵入細(xì)小血管及淋巴管 道中，侵潤(rùn)比較明顯，分化程度比較低。 |
