| 產(chǎn)品名稱(chēng) |
人膠質(zhì)瘤組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4282 |
| 組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的膠質(zhì)瘤組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
神經(jīng)膠質(zhì)瘤來(lái)自神經(jīng)系統(tǒng)支持組織，屬外胚葉腫瘤，很多膠質(zhì)瘤其瘤細(xì)胞與成熟 的或未成熟的膠質(zhì)細(xì)胞相似。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分型 |
（1）星形細(xì)胞瘤 ①發(fā)生： 由星形細(xì)胞發(fā)生，占膠質(zhì)瘤中的半數(shù)以上，成年人多發(fā)生在大腦半球，小兒多發(fā)生在小 腦。其它如丘腦、腦干和脊髓均可發(fā)生，星形細(xì)胞瘤可分為纖維型和原漿型兩類(lèi)，腫瘤在腦 內(nèi)呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，大小不一，可以侵犯1 個(gè)或2 個(gè)以上的腦葉，甚至經(jīng)胼胝體侵入對(duì)側(cè)大腦 半球。 ②大體形態(tài)： 纖維型星形細(xì)胞瘤比較硬韌，原漿型星形細(xì)胞瘤質(zhì)軟，常可見(jiàn)有囊性變，瘤內(nèi)出血和壞 死比較少見(jiàn)。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織由分化比較成熟的星形細(xì)胞組成，纖維型星形細(xì)胞瘤富于膠質(zhì)纖維，原漿型星形 細(xì)胞瘤富于細(xì)胞漿，若是星形細(xì)胞比較密集，細(xì)胞有異型性，且見(jiàn)絲狀核分裂像，血管內(nèi)皮 細(xì)胞和外膜細(xì)胞增生，小灶狀出血和壞死，則稱(chēng)星形母細(xì)胞瘤，或稱(chēng)分化不良星形細(xì)胞瘤。 （2）多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 ①發(fā)生： 是成年人比較多見(jiàn)的惡性膠質(zhì)瘤，發(fā)生率僅次于星形細(xì)胞瘤，多發(fā)生在大腦半球，很少 發(fā)生在小腦。②大體形態(tài)： 腫瘤浸潤(rùn)范圍比較大，可以侵犯幾個(gè)腦葉，或經(jīng)胼胝體侵犯對(duì)側(cè)大腦半球，腫瘤質(zhì)軟， 灰紅色，常出現(xiàn)大片出血和壞死區(qū)，瘤周?chē)M織顯著水腫，甚至液化，出現(xiàn)假性分界，其實(shí) 瘤細(xì)胞浸潤(rùn)范圍遠(yuǎn)較肉眼所見(jiàn)廣泛得多。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細(xì)胞分化不成熟，多形性，異型性，有較多核分裂像，常出現(xiàn)單核和多核瘤巨細(xì)胞。 血管內(nèi)皮細(xì)胞和外膜細(xì)胞顯著增生，血管腔內(nèi)有血栓形成，散在大片出血和壞死，分化 不良星形母細(xì)胞瘤沒(méi)有明確的區(qū)。 （3）少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤和少突膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 ①發(fā)生： 由少突膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生，患者多是中年人，也可見(jiàn)于兒童，主要發(fā)生在大腦半球白質(zhì)內(nèi)。 ②大體形態(tài)： 腫瘤質(zhì)軟，灰紅色，界限不清，常有鈣化和囊性變。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細(xì)胞形態(tài)比較一致，胞核圓形，深染，核周胞漿因水腫而顯空白，間質(zhì)少，常見(jiàn)鈣化 灶和囊腫形成若是瘤細(xì)胞大小、形態(tài)、核染色性不一致，并出現(xiàn)巨瘤細(xì)胞，具有核分裂像， 血管內(nèi)皮細(xì)胞增生，有出血和壞死，則稱(chēng)少突膠質(zhì)母細(xì)胞瘤。 （4）室管膜瘤和室管膜母細(xì)胞瘤 ①發(fā)生 常和腦室壁和中央管有聯(lián)系，多見(jiàn)于第四腦室、側(cè)腦室和脊髓內(nèi)，患者多為幼兒和青年 人。 ②大體形態(tài)： 腫瘤灰紅色，質(zhì)軟，多呈結(jié)節(jié)狀突于腦室腔內(nèi)或位于腦或脊髓實(shí)質(zhì)內(nèi)。 ③顯微鏡下形態(tài)：室管膜瘤分為上皮型、乳頭型、乳頭粘液型和細(xì)胞型四種。（5）混 合性膠質(zhì)瘤 腫瘤是由兩種或者兩種以上的膠質(zhì)瘤類(lèi)型所組成，各占相當(dāng)?shù)姆至浚@種膠質(zhì)瘤多見(jiàn)于 小兒，可見(jiàn)于小腦及大腦內(nèi)，肉眼觀察與一般膠質(zhì)瘤形態(tài)無(wú)異，需依靠組織學(xué)檢查來(lái)診斷。 （6）髓母細(xì)胞瘤 ①發(fā)生 是小兒顱內(nèi)較常見(jiàn)的惡性腫瘤，主要發(fā)生在小腦蚓部，可突入第四腦室內(nèi)，亦可侵入周 圍組織，常沿腦脊液呈種植性播散。 ②大體形態(tài)： 腫瘤紫紅色，粘凍狀，與腦實(shí)質(zhì)之間界限不清，出血壞死少見(jiàn)。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤細(xì)胞密集，間質(zhì)少，瘤細(xì)胞小，胞核園形或橢圓形，深染，胞漿少，核分裂像多 見(jiàn)，細(xì)胞常呈假菊花形排列，如腫瘤侵及軟膜，常伴有纖維結(jié)締組織的明顯增生。 （7）脈絡(luò)叢乳頭狀瘤 ①發(fā)生 由腦室內(nèi)脈絡(luò)叢發(fā)生，好發(fā)于第四腦室和側(cè)腦室可經(jīng)第四腦室側(cè)孔突入小腦橋腦角 內(nèi)生長(zhǎng)。②大體形態(tài)：腫瘤呈粉紅色，質(zhì)軟，表面呈絨毛狀，常見(jiàn)有鈣化。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織呈乳頭樣結(jié)構(gòu)，外覆蓋著分化良好的上皮細(xì)胞，可有鈣化或砂粒小體形成， 其惡性類(lèi)型稱(chēng)脈絡(luò)叢乳頭狀癌。 ①發(fā)生 比較少見(jiàn)，多發(fā)生在青年人，常見(jiàn)在第三腦室后部，即松果體部位。 ②大體形態(tài)： 腫瘤灰紅色，球形，無(wú)包膜形成。 ③顯微鏡下形態(tài)： 瘤組織由單一的上皮樣細(xì)胞組成，胞體大小中等，核圓或橢圓形，含較多染色質(zhì)而 深染，大多沒(méi)有核仁，胞漿淡而界線不清，分布于纖維組織所形成的間質(zhì)中，一般無(wú)核分裂 像，松果體母細(xì)胞瘤則由較密集的小細(xì)胞組成，其分化程度低，細(xì)胞核小而密集，胞漿稀少, 染色極深 |
