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小鼠原代骨骼肌細胞
小鼠原代骨骼肌細胞
規(guī)格:
貨期:
編號:MZ-514
品牌:Mingzhoubio

活化細胞
凍存細胞
熒光標記細胞

規(guī)格:
T25瓶
凍存管

產品名稱 小鼠原代骨骼肌細胞
商品貨號 MZ-514
組織來源 昆明、C57小鼠(出生1-3天)3-5只
規(guī)格 5×105cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
培養(yǎng)基 建議購買原代配套完培
細胞污染 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。
細胞描述 骨骼肌衛(wèi)星細胞是位于基膜與肌膜之間未分化的細胞,一般情況下處于靜止狀態(tài),當肌細胞受到損傷刺激時,衛(wèi)星細胞被激活,更新,增殖,分化并與原有的骨骼肌細胞相互融合,形成新的肌纖維細胞。 肌組織作為人體的最大組織,同其它組織相比來源更豐富。大量研究證實衛(wèi)星細胞對骨骼肌受創(chuàng)傷后肌纖維的再生和修復起著重要作用。細胞鑒定肌動蛋白(α-actin)免疫熒光染色為陽性
細胞傳代步驟 如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
主要功能 (1) 骨骼肌受損時,靜止的、被稱為衛(wèi)星細胞的成肌細胞被激活增殖、遷移、最終 分化。 (2) 多種的細胞信號途徑,包括磷脂酰肌醇(-3)激酶、鈣神經素、JAK2/STAT3 和有絲分裂原活化蛋白激酶,參與骨骼肌的生長。
主要病生理變化 (1) 骨骼肌萎縮。 (2) 骨骼肌拉傷。 (3) 骨骼肌壞死。
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