結(jié)核分枝桿菌基因(TB-DNA)擴增檢測是通過將細(xì)菌所含的基因片段進(jìn)行體外擴增的技術(shù),檢測懷疑結(jié)核分枝桿菌感染但無癥狀者體內(nèi)是否含有此類細(xì)菌的檢查方法。
中文名:結(jié)核分枝桿菌基因擴增檢測
參考范圍:檢測結(jié)果陰性
臨床意義:快速診斷、治療監(jiān)測
二、檢查前準(zhǔn)備
1、向患者交代病情,告知患者進(jìn)行檢查的目的,幫助患者放松心情。
2、囑患者正常飲食和睡眠。
三、操作方法
1、標(biāo)本類型有痰液、腦脊液、肺泡灌洗液、胸膜腔積液(胸水)、腹膜腔積液(腹水)、尿液、血液、分泌物等。
2、痰標(biāo)本中含有大量黏蛋白和雜質(zhì),故在核酸提取前,需對樣本進(jìn)行前處理,即用NaOH或變性劑進(jìn)行液化洗滌。處理后的標(biāo)本如不立即用于核酸提取,可保存于-20。
3、胸膜腔積液、腹膜腔積液穿刺液含菌量少,需要較多的標(biāo)本,離心后取沉淀進(jìn)行檢測。如果含有大量蛋白質(zhì)和雜質(zhì),需用NaOH對樣本進(jìn)行前處理。處理后4保存不超過24 h,-20保存不超過3個月,-70可長期保存。冰凍保存后不宜反復(fù)凍融。
4、如標(biāo)本含血,必須加紅細(xì)胞裂解液處理。處理后4保存不超過24 h,-20保存不超過3個月,-70可長期保存。冰凍保存后不宜反復(fù)凍融。
四、參考范圍
檢測結(jié)果陰性(實時熒光PCR定性)。TB-DNA定量測定結(jié)果小于實驗室設(shè)定的參考下限(實時熒光PCR定量)。
五、臨床意義
1、快速診斷。因結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)周期長,臨床很難采用培養(yǎng)的方法進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌感染的快速檢測。通過對痰液、血液、腦脊液等標(biāo)本中結(jié)核分枝桿菌的PCR檢測,可以快速診斷肺結(jié)核、結(jié)核分枝桿菌菌血癥、淋巴結(jié)核、結(jié)核性腦膜炎、結(jié)核性胸膜炎及腹膜炎等。
2、治療監(jiān)測。在結(jié)核治療中,采用實時熒光PCR法定期檢測,可評價抗結(jié)核藥物的療效。
3、PCR檢測的是病原體核酸,不管結(jié)核分枝桿菌是否為活的細(xì)菌,實時熒光PCR法均能檢出。因此,在抗生素治療一個療程后,必須兩周后才能做PCR檢測,以免造成假陽性結(jié)果。