人結直腸腺癌細胞(HCT-8) 與HRT-18 是一樣的。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。
1) 來源:結腸
2) 形態(tài):上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25 瓶或者1mL 凍存管包裝
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復蘇;
(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
人結直腸腺癌細胞(HCT-8)用途:僅供科研使用。
人結直腸腺癌細胞(HCT-8)培養(yǎng)步驟:
一.人結直腸腺癌細胞(HCT-8)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L,
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL 細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS 潤洗細胞1-2 次。
2. 加2ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM 條件下離心4 分鐘,棄去上清液,補加1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2 到1:5 的比例分到新的含8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄
注意事項:
1. 收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注