一、產(chǎn)品簡介
1. 產(chǎn)品名稱: 大鼠肝竇內(nèi)皮細胞
2. 組織來源:肝臟組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格:如 105cellsT25細胞培養(yǎng)瓶
4. 細胞簡介:
大鼠肝竇內(nèi)皮細胞細胞分離自肝臟組織: 肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一 個器官, 并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用; 肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官,位于機體中的腹部 位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝 臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺, 為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官, 又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu): 肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)脯下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋 弓間露出并直接接觸腹前壁, 肝上面則與腦及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細胞(SEC) 是肝臟內(nèi)所占比例最高的非實質(zhì)細胞, 位于肝竇腔與肝細胞之間, 具有物質(zhì)轉(zhuǎn)
本公司生產(chǎn)的大鼠肝竇內(nèi)皮細胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心、密度梯度離心法, 并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來, 細胞總量約為5× 105cells/瓶: 細胞經(jīng)Dil-Ac-LDL免疫熒光鑒定, 純度可達90%以上, 且不含有HIV-
5. 培養(yǎng)基信息:
Ml 99、FBS、內(nèi)皮細胞生長添加劑、Heparin, Ascorbic Acid、Hydrocortisone、
Penicillin、S位eptomycin等
我們推薦使用大鼠肝 竇內(nèi)皮細胞專用完全培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨:號CM-R040)作為體外培養(yǎng)大鼠肝竇內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)基。
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
技術(shù)部標準操作流程下,大鼠肝竇內(nèi)皮細胞可傳3-5代:建議您收到細胞 后盡快進行相關(guān)實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用 75% 酒精消毒瓶身, 拆下封口膜, 放入37℃、5%C0 2、 飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定 細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用 PBS 清洗細胞一次:
2) 添加0.25%腆蛋白酶消化液l mL至培養(yǎng)瓶中, 輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后, 吸出多余膜蛋白酶消化液, 37 ℃ 溫浴l -3min: 倒置顯微鏡下觀察, 待細胞回縮變圓后, 再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化:
3) 用吸管輕輕吹打混勻, 按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代, 然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL, 置于37℃、5%C0 2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng):
4) 待細胞完全貼壁后, 培養(yǎng)觀察: 之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,腆酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片, 記錄細胞狀態(tài), 便于和技術(shù)部溝通:由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系, 詳盡告知細胞的具體情況,以 使我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
5. 該細胞只可用于科研。
備注: 由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同, 以上方法僅供各實驗室參考